麦康凯琼脂培养基MCA

　　相关琼脂培养基的融化：培养基放到沸水浴中或采用其他有相同效果的方法（如高压锅中的蒸汽）融化。

　　经过高压灭菌的培养基尽量减少重新加热的时间，避免过度加热。培养基融化后立即移开，室温静置片刻（约2min)，以免玻璃容器发生破裂。融化后的培养基放人47℃～50℃恒温水浴锅中保温，冷却到47℃～50℃所需的时间取决于培养基的类型、体积和在水在锅里的分装量。

　　融化后的培养基应尽快使用，放置时间一般不超过4h。剩余的培养基凝固后不得再次融化使用。特别是灵敏性培养基，应根据相关标准，缩短融化后放置的时间。将琼脂培养基倒人类似检测培养基使用的独立容器中，插入温度计，记录并保存琼脂的融化、温度。加入样品的培养基应将温度调节到44℃～47℃，或按照相关标准调节温度。

　　水浴保温的顶层培养基中依次加入测试增菌液0.1 mL(需活化时另加10％S9混合液o．5 mL)，混匀，迅速倾入底层培养基上，转动平板，使顶层培养基在底层分布均匀。

　　平放固化后取无菌滤纸片(直径约为6 mm)，小心放在已固化的顶层培养基的适当位置上，用移液器取适量受试物(如10μL)，点在纸片上，或将少量固体受试物结晶加到纸片或琼脂表面；37℃培养48 h观察结果。